分光色度仪的测试步骤演示案例

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分光色度仪的测试步骤演示案例
点击次数：2176 更新时间：2015-12-08
一、原理
碘化汞和碘化钾的碱性溶液与氨反应生成淡黄棕色胶态化合物，其色度与氨氮含量成正比，通常可在波长410 — 425nm 范围内测其吸光度，计算其含量。本法zui低检出浓度为 0.025mg/L （光度法），测定上限为 2mg/L 。
二、仪器
1 ． 500mL 全玻璃蒸馏器。
2 ． 50mL 具塞比色管。
3 ．分光光度计。
4 ． pH 计。
三、试剂
配制试剂用水均应为无氨水。
1 ．无氨水：可用一般纯水通过强酸性阳离子交换树脂或加硫酸和高锰酸钾后，重蒸馏得到。
2． 1mol/L 氢氧化钠溶液。
3．吸收液：①硼酸溶液：称取 20g 硼酸溶于水中，稀释至 1L 。
② 0.01mol/L 硫酸溶液。
4 ．纳氏试剂：称取 16g 氢氧化钠，溶于 50mL 水中，充分冷却至室温。
另称取 7g 碘化钾和碘化汞 (HgI2) 溶于水，然后将此溶液在搅拌下徐徐注入氢氧化钠溶液中。用水稀释至 100mL ，贮于聚乙烯瓶中，密塞保存。
5 ．酒石酸钾钠溶液：称取 50g 酒石酸钾钠 (KNaC4H4O6 · 4H2O) 溶于 100mL 水中，加热煮沸以除去氨，放冷，定容至 100mL 。
6 ．铵标准贮备溶液：称取 3.819g 经 100 ℃干燥过的氯化铵 (NH4Cl) 溶于水中，移入 1000mL 容量瓶中，稀释至标线。此溶液每毫升含 1.00mg 氨氮。
7 ．铵标准使用溶液：移取 5.00mL 铵标准贮备液于 500mL 容量瓶中，用水稀释至标线。此溶液每毫升含 0.010mg 氨氮。
四、测定步骤
1 ．水样预处理：无色澄清的水样可直接测定；色度、浑浊度较高和含干扰物质较多的水样，需经过蒸馏或混凝沉淀等预处理步骤。
2 ．标准曲线的绘制：吸取 0 、 0.50 、 1.00 、 3.00 、 5.00 、 7.00 和 10.0mL 铵标准使用液于 50mL 比色管中，加水至标线，加 1.0mL 酒石酸钾钠溶液，混匀。加 1.5mL 纳氏试剂，混匀。放置10min 后，在波长 420nm 处，用光程 10mm 比色皿，以水为参比，测定吸光度。
由测得的吸光度，减去零浓度空白管的吸光度后，得到校正吸光度，绘制以氨氮含量（ mg ）对校正吸光度的标准曲线。
3 ．水样的测定：分取适量的水样（使氨氮含量不超过 0.1mg ），加入 50mL 比色管中，稀释至标线，加 1.0mL 酒石酸钾钠溶液（经蒸馏预处理过的水样，水样及标准管中均不加此试剂），混匀，加 1.5mL的纳氏试剂，混匀，放置 10min 。
4 ．空白试验：以无氨水代替水样，作全程序空白测定。
五、计算
由水样测得的吸光度减去空白实验的吸光度后，从标准曲线上查得氨氮含量（ mg ）。
氨氮 (N,mg/L)=m × 1000/V
式中： ——由校准曲线查得样品管的氨氮含量（ mg ）；
V ——水样体积（ mL ）。
注意事项
1 、纳氏试剂中碘化汞与碘化钾的比例，对显色反应的灵敏度有较大影响。静置后生成的沉淀应除去。
2 、滤纸中常含痕量铵盐，使用时注意用无氨水洗涤。所用玻璃器皿应避免实验室空气中氨的沾污。